Akcja "Vampire: The Masquerade - Bloodlines" rozgrywa się w znanym z gier fabularnych wydawnictwa White Wolf, uniwersum Świata Mroku. Wcielamy się w niej w postać niedawno przemienionego wampira, należącego do jednego z siedmiu klanów Camarilli. Musi się on odnaleźć w nowej roli w mrocznym i niebezpiecznym Los Angeles. Dość szybko zdajemy sobie sprawę, że wyzwania związane z zachowaniem tytułowej Maskarady, czyli przestrzeganiem reguł i zasad, dzięki którym społeczeństwo krwiopijców utrzymuje swe istnienie w tajemnicy przed ludźmi, nie jest naszym największym problemem. Zostajemy bowiem wciągnięci w sam środek konfliktu między wampirzymi sektami Camarilli, Sabbatu, Anarchistów i Kuei-Jin. Sytuację komplikuje dodatkowo fakt odnalezienia przez ludzkiego archeologa starożytnego asyryjskiego sarkofagu, w którym spoczywać mają zwłoki jednego z Antediluvian - założycieli i protoplastów istniejących klanów. Ich powrót, według przepowiedni, jest zwiastunem rychłego nadejścia Gehenny - wampirzego odpowiednika apokalipsy. Przywódcy poszczególnych sekt i klanów mają własne plany, zarówno wobec sarkofagu, jak i postaci kierowanej przez gracza.